Каков Гигромицин B?
Гигромицин B является антибиотиком, который используется в имитации рекомбинантного гена, чтобы выбрать клетки, которые были преобразованы с желаемой последовательностью ДНК. Это действия, чтобы уничтожить непреобразованные, восприимчивые клетки, замедляя синтез белка. Этот состав может использоваться в бактериальном, грибковом, растении, и клеточных культурах млекопитающих. Произведенный почвенным actinomycete Streptomyces hygroscopicus , гигромицин B также добавлен к исходному сырью для цыпленка и свиньи, чтобы препятствовать им заражаться паразитами, такими как черви.
Актиномицеты тип бактерий, которые являются общими жителями почвы. Они производят множество натуральных продуктов, которые являются ядом к другим организмам, чтобы помочь им конкурировать и выжить в почве. Много различных типов антибиотиков были изолированы от этих организмов, включая стрептомицин и actinomycin. В 1953 был обнаружен гигромицин B. Хотя яд людям, его первое использование должно было увеличить еду домашней птицы и скребков для очистки труб, чтобы предотвратить инвазию червя.
Гигромицин B является примером класса aminoglycoside антибиотиков. Это состоит из сахара, у которого есть аминогруппы на них. У нескольких различных видов бактерий, как находили, была устойчивость этому антибиотику. Эта устойчивость активизирована передачей фосфорнокислой группы к hydroxylв– OHв– группа на антибиотической молекуле. Белок, который выполняет эту реакцию, известен как гигромицин B phosphotransferase (Hph).
Механизм действия гигромицина B должен замедлять синтез белка, воздействуя на перевод РНК посредника (mRNA). Белки составлены из длинных цепей аминокислот. Обычно, рибосомы проходят проволока mRNA и делают аминокислоту согласно группе из трех оснований mRNA известной как кодон. Когда антибиотик присутствует, рибосомы не читают кодон должным образом и неправильно переводят. Вообще, это приводит к завершению синтеза белка.
С появлением рекомбинантной технологии ДНК ученые смогли имитировать гены Hph от нескольких различных типов бактерий. Один тип гена был найден в actinomycete, который делает антибиотик, и другой был найден в бактериях негатива грамма Escherichia coli ( E. coli ) и Klebsiella pneumoniae . Начиная с <них> E. coli так обычно управляют в генной инженерии, ее ген - тот, обычно используемый в экспериментах. Способ действия этого антибиотика отличается чем те из многих других, позволяя это часто использоваться в комбинации с дополнительным типом антибиотика.
Этот гигромицин B ген устойчивости широко используется в качестве селектируемого маркера во время имитации экспериментов. Таким образом, это используется на рекомбинантной плазмиде, которая также содержит ген, который ученые хотят ввести в организм, такой как плесень или линия растительной клетки. У только нескольких клеток в большой смеси клеток вообще будет желаемая плазмида. Когда антибиотик будет добавлен к клеточной смеси, он уничтожит восприимчивые клетки, которые не поднимали рекомбинантную плазмиду. Этот гигромицин B выбор гарантирует, что остающиеся клетки продолжат содержать ген интереса.